Kit para concentração e deteção de uma estirpe bacteriana alvo numa amostra, métodos, produtos e utilizações dos mesmos.

O objeto desta patente é uma nova tecnologia de um biossensor para deteção de Listeria monocytogenes, mediante recurso a estruturas híbridas de nanoflowers orgânicas-inorgânicas (HNF) como plataformas do biossensor. Os pontos-chave do âmbito são os seguintes: i) Problema alvo: Listeria monocytogenes, uma bactéria patogénica de distribuição ubiquitária, representa um risco significativo para a saúde pública, tratando-se do agente causal da listeriose, a infeção de origem alimentar com a maior taxa de mortalidade na União Europeia. Os métodos convencionais de deteção de Lm (baseados em técnicas clássicas de microbiologia) são morosos e trabalhosos, pelo que urge o desenvolvimento e implementação de métodos alternativos mais rápidos, eficientes, portáteis, obviando a necessidade de recurso a equipamentos robustos e técnicos especializados. ii) Inovação: Esta patente centra-se em biossensores com uma performance analítica superior para deteção de bactérias patogénicas, particularmente biossensores “sandwich” acoplando uma plataforma magnética com nanoflowers híbridas orgânicas-inorgânicas. Estes sistemas são particularmente eficazes devido à sua elevada razão superfície-volume, arquitetura versátil e potencial para optimizar propriedades catalíticas, óticas ou elétricas – ideais para plataformas de deteção sensíveis (baixo limite de deteção) que permitem a análise direta de amostras complexas, sem necessidade de um processamento prévio das mesmas. A invenção sugere especificamente o uso de bacteriocinas (péptidos antibacterianos, passíveis de serem modificados por bioengenharia) como elementos de bioreconhecimento subexplorados/utilizados, em alternativa a biorecetores mais comumente utilizados, como enzimas, anticorpos ou oligonucleótidos. As bacteriocinas conferem especificidade e eficiência na captura e deteção de L. monocytogenes. iii) Estado da arte: Na bibliografia não foi encontrado nenhum documento que descrevesse a utilização de bacteriocinas como bioreceptores em sensores baseados em HNF para deteção de bactérias. Referencia-se apenas um estudo envolvendo uma bacteriocina (nisina) num tipo e estrutura diferente de nanoflower para utilização como conservante alimentar, documentando-se a sua atividade antimicrobiana específica para Staphylococcus aureus. A análise crítica do estado da arte posiciona a presente invenção como uma nova aplicação de bacteriocinas, nomeadamente, sakacina X, na funcionalização de um biossensor baseado em nanoflowers orgânicas-inorgânicas específico para a deteção com elevada sensibilidade (baixo limite de deteção) de L. monocytogenes. iv) Aplicações: Embora o foco principal da presente patente seja a deteção rápida e “on-site" de L. monocytogenes em amostras clínicas, alimentares, e ambientais, a tecnologia também pode ser relevante para outras bactérias patogénicas se os componentes de bioreconhecimento forem adaptados adequadamente. Este sistema sandwich pode ainda ser integrado num sistema "lab-on-a-chip” para uma análise automatizada, "sample-in-result-out", e acoplada a um sistema de machine learning . Em essência, o âmbito da patente é um biossensor de performance analítica superior que se baseia na tecnologia híbrida de nanoflowers funcionalizadas com sakacina X acopladas a uma plataforma fagomagnética para a detecção sensível, rápida e específica de L. monocytogenes em matrizes complexas, sem recurso a métodos de enriquecimento ou processamento prévio das amostras, permitindo a sua análise direta.